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2020年银水湾论坛—非洲猪瘟系列检测技术与疫苗研发的进展及 实验室检测在非洲猪瘟防控中的作用


5月15日,由哈尔滨国生生物科技股份有限公司主办的银水湾论坛网上课堂开讲啦。第一节课由中国农业科学院哈尔滨兽医研究所猪传染病研究室主任、猪烈性传染病创新团队首席科学家仇华吉研究员给大家带来《走在病毒前面----实验室检测在非洲猪瘟检测中的作用》。

仇老师主要从事猪瘟、非洲猪瘟和伪狂犬病等烈性传染病的基础和应用研究。先后主持国家863项目、国家十三五重点研发项目、国家自然科学基金重点项目等20余项,以通讯作者发表SCI收录论文70余篇,获国家科技进步二等奖2项、黑龙江省科技进步一等奖3项、国家发明专利9项、农业转基因产品安全证书2个,主编或参编学术专著8部。

非洲猪瘟自2018年进入中国,已经在我国扩散和流行近两年时间。现在这个病大面积已经被控制住了,但是在局部地区还呈现区域性的散发或者地方性的流行。本次网上讲堂特邀仇华吉研究员给我们讲述非洲猪瘟系列检测技术与疫苗研发的进展及实验室检测在非洲猪瘟防控中的作用等一系列问题。下面让我们走进仇老师的课堂。

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仇老师给大家细致的分析了当前养猪业的形势:目前我国种猪缺口比较大,产能有限,恢复正常生产性能仍要一段时间;生猪的存栏量处于一个较低水平,总体市场供应呈现出一种供不应求的情形,因此猪肉价格整体来说还是会缓慢的上涨。

仇老师指出目前国家对于养猪业的任务要求:到2020年底,我国农业部要求我国的生猪存栏量恢复到疫情前的80%,选取一部分肉猪(三元母猪)进入种猪行列,尽快恢复产能,养猪业是我们国家“稳产保供”的一个政治任务,这是一个民生课题,是关系国家国计民生的大事。


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那么,对于非洲猪瘟大家是如何看待的呢?仇老师表示,科学家以及养殖户经过一年多与非洲猪瘟的较量,已经对它有了科学的认识,少了最初爆发时的恐惧,只要依靠生物安全技术以及科学的精细化管理,另外在资金、技术、人才方面有一定的保障,非洲猪瘟是可防可控的。


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我们国家养猪业是一个系统工程,所以防控非洲猪瘟更应该注重的是在品种、营养、环境、管理、防疫等方面的综合实力。仇老师向大家分享了科学的“防非战略”:笃定决心、坚定信心,系统思维、综合防控,科学决策、精准施策,实事求是,与时俱进;以及“防非策略”:控制传染源头,降低病毒载量,提升感染阈值,维持阴性群体。防非的重点主要在于防控,仇老师告诫我们应当重点关注防控非洲猪瘟的三个重要环节:阻断病毒源头,降低病毒载量,提高猪只耐受性。

现在新冠肺炎疫情后的复工复产已基本开始了,一些猪场陆续开始复养。为了使大家复养成功,仇老师讲解了复养的程序主要有以下几个方面:①复养前,进行风险评估,评估猪场所在位置的大环境。②猪场硬件设备升级改造,对猪场制度流程的完善。③定期全面洗消(消毒-清洗-消毒-干燥-熏蒸)。④科学、全面的取样、采样。⑤哨兵猪的选取。⑥技术人员持证上岗,系统培训,定期考核。⑦全面复养,持续检测。⑧制定应急预案,并反复演练。

仇老师强调,科学复养的过程其实并不难,但是复养完成后,更应该引起我们重视的是如何避免病毒再次光临猪场呢?仇老师表示,要通过实验室检测,实验室检测就像国防雷达系统一样,是养猪人的眼睛,大家肉眼是看不到病毒的活动迹象的,但是可以借助科学的生物安全监测,包括风险预警、洗消效果评价、生物安全流程优化、精准清除复养前评估等。

仇老师向我们介绍了实验室常用的非洲猪瘟检测方法,分为核酸检测、抗原检测和抗体检测。仇老师有细致的分析了不同的检测方法的各优缺点。如下表所示。


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实验室检测非洲猪瘟的试剂盒,仇老师具体介绍了两种荧光PCR试剂盒:普通型和免提取型。同时与其他试剂盒的各个参数进行了比较,为大家选取适合自己猪场的试剂盒提供参考。另外还有敏感性比较好的抗原抗体检测方法可供大家选取。


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如果大家担心遇到非洲猪瘟和猪瘟两种不同传染病交叉感染的情况时,不要慌!仇老师向我们系统的讲解了非洲猪瘟和猪瘟双重荧光定量PCR的方法,非洲猪瘟敏感性为每微升10拷贝,而猪瘟的检测限可达每毫升10 TCID50。


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各种实验室检测的原理、方法,仇老师已经全面的向大家展示了,但是为了在检测时不出现污染的情况,仇老师告诫我们,实验室检测布局也是获取正确的实验结果所必须的,实验室检测布局要做到实验功能分区,样品处理、核酸提取、加样、PCR扩增等不同区域单向流动,互不交叉;在做完实验后要对实验区域进行消毒,保证后续实验顺利进行;实验过程要进行生物安全措施,对样品进行无害化处理;定期对实验室环境进行评估,以及各种污染治理。


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检测前,科学合理的采集样品也是保障实验室检测顺利进行的一个重要环节,而且仇老师也着重强调了,采样不仅仅只是在猪场内外环境,还要对人员及运输车辆入场前、洗消烘前后进行采样,对于高风险猪可以采样后再进行无害化处理,为后续防控提供依据。

检测后,对实验结果出现假阳性和假阴性怎么办?别急,仇老师分析原因可供大家参考:①检测方法/试剂盒的特异性和敏感性差;②环境污染(气溶胶污染、人员流动造成交叉污染、仪器消毒不彻底等);③采样不规范,样品处理或保存不当,样品中含有其它杂质等;④核酸提取/PCR扩增失败;⑤病毒基因组发生变异。

仇老师表示,避免出现这些假阳性和假阴性的实验结果,就要提高实验室检测的准确性,可以从以下几个方面注意:①技术人员定期培训;②优化实验流程方案;③设立对照组;④选择特异性好,灵敏度高的检测试剂盒;⑤选择实验最适合的检测方法;⑥PCR实验室环境污染监控,监控频率要每周1至2次。

随后,仇老师给大家介绍了实验室常见的检测误区,包括:检测与临床的脱节、实验室设计不合理、采样设计不科学、检测滞后、混淆诊断性样本和筛查性样本、分不清诊断性检测和风险评估、对检测方法的优缺点认知不清等一系列实验室常见问题;并着重对并联检测和串联检测进行讲解。


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最后仇老师在直播间进行了答疑,解决了大家的问题,非常感谢仇老师为大家解答疑惑。这一次课堂仇老师系统全面的从当前养猪业的形势和任务、对非洲猪瘟的科学认知、防非的系统思维、非洲猪瘟防控关键点、非洲猪瘟疫情后的复养程序和实验室检测各个方面进行系统的阐述,为非洲猪瘟疫情后我国养殖户恢复猪只饲养提供了全方位的指导,希望能给大家带来帮助。最后,再次感谢仇华吉研究员的精彩分享!

 

银水湾论坛:             

自2016年以来,《银水湾论坛》已成功举办四届。论坛由哈尔滨国生生物科技股份有限公司(动物用生物制品国家工程研究中心)与股东单位哈尔滨维科生物技术开发公司、哈药集团生物疫苗有限公司共同主办,中国农业科学院哈尔滨兽医研究所、中国兽医药品监察所、北京中海生物科技有限公司协办。

四年来,本着“引领中国兽用生物制品产业技术创新与融合发展,构建公益性平台的办会宗旨”,汇聚行业精英各抒己见,聚焦行业健康发展共商良策,力求从不同视角、更高角度为行业同仁们提供一个展示与交流的平台,促进行业技术进步,《银水湾论坛》已成为在业内享有较高盛誉和影响力的行业盛会。

《银水湾论坛》网上课堂会继续秉持“创新、融合、发展”的精神,邀请业内大咖做客直播间,为大家构建便捷、有效、公益性的前沿知识学习平台。

企业介绍:

哈尔滨国生生物科技股份有限公司(动物用生物制品国家工程研究中心,以下简称国生生物)是经国家发改委批准,由中国农业科学院哈尔滨兽医研究所牵头,联合中国兽医药品监察所等企事业单位共同组建、具有独立法人资格的科技型高新技术企业,是动物生物制品行业内唯一的国家级工程研究中心。形成了从动物生物制品的研发、孵化、转化到生产和销售的全产业链,建立了多个开放性技术平台,成为国内领先的动物生物制品新产品的创新基地、孵化基地和示范性生产验证基地。

牧科传媒 陈静整理